干细胞扩增试剂盒

一、简介

GenVaxell干细胞扩增试剂盒专用于干细胞的扩增培养。试剂盒中初始培养基GV stem SFM01，为无血清培养基，不含血清、水解物及任何动物来源的成分。
二、产品描述

三、产品运输及存储
运输：-20℃以下或冷链运输；
存储与有效期：
GV stem BM01 液体2~8℃避光保存3个月，超过三个月使用时补加2 mM谷氨酰胺；
Stemplus液体2-8℃保存1个月，-20℃及以下保存5年；
四、应用范围与使用方法
1．解冻：37℃水浴解冻，不可反复冻融，否则会有不溶物；
2．细胞传代：建议接种密度为0.8万~2万个细胞/cm2，细胞达到汇合度80%及以上可进行消化和传代;
3．细胞消化：
（1）37℃水浴中预热消化液及培养液。
（2）吸出用过的培养基并丢弃。
（3） 使用5 mL不含钙离子和镁离子的DPBS缓冲液洗涤细胞，吸出残余培养基并丢弃。
（4）添加适当体积的重组胰蛋白酶消化液，以能覆盖细胞为限。
（5） 37℃孵育细胞，孵育期间使用显微镜下观察，至细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化，或者轻敲培养瓶发现细胞处于游离状态。
（6） 在培养瓶中加入5~10 mL的预热完全的培养基，终止消化，细胞悬液转移至15 mL离心管中。
（7） 300~500×g离心5~10分钟。丢弃上清液并将细胞重悬于新鲜预热培养基中，计数确定细胞密度与活率。
（8）根据您的细胞类型，按照常规方案进行后续实验。
五、注意事项
1．避免Stemplus的反复冻融，解冻时37℃水浴；
2．GV stem BM01建议3个月内用完。
六、实验数据
案例一：脂肪干细胞：只添加1.5%的胎牛血清即可媲美高浓度血替+a-Mem组合

图1  细胞在微载体上形态图

图2  细胞密度（从左往右依次是竞品1-2-3-4-含1.5%血清stem-3%血清stem)

案例二：间充质干细胞：更快的扩增倍数和细胞量，且保持良好的干性：

图3  阳性标志图
阳性标志 （CD73/CD90/CD105） 比例高于99%，阴性标志 （CD34/CD45/HLA-DR）比例低于1%

案例三：间充质干细胞：外泌体表达量高于竞品近一个数量级。

图4  与竞品细胞生长、外泌体表达对比图